За допомогою радіоімунологічних або неізотопних імунохімічних методів визначають GH, PRL, ACTH (розд.V.D.2.1.2), TSH (розд. IV.B.2.2.1.1), LH, FSH та α субодиницю (αSU). Враховують час забору (циркадні ритми), глікемію (натще, після їжі) та, залежні від методики, способи забору крові (плазма або сироватка). Інформацію про умови забору, фіксації та транспортування матеріалу (особливо важливо для ACTH) слід отримати в лабораторії. Однразові визначення мають діагностичне значення, головним чином, для оцінки TSH, LH, FSH, PRL i αSU. Також визначають добові ритми гормонів гіпофіза, особливо ACTH i PRL.
Найбільше інформації надають функціональні тести (табл.IV.A.2-1).
Проби стимуляції синтетичними гіпоталамічними ліберинами (GHRH, CRH, TRH, GnRH) або іншими факторами, що стимулюють відповідь гіпофіза, використовують для оцінки функціонального резерву гормонів гіпофіза; вони дозволяють:
1) підтвердити первинну недостатність передньої долі гіпофіза (низькі базальні значення та відсутність стимуляції ліберинами)
2) діагностувати вторинний, гіпоталамус-залежний, моногормональний або повний гіпопітуїтаризм (підвищення тропних гормонів гіпофіза після стимуляції екзогенними ліберинами).
Наприклад, при оцінці секреції GH до завершення росту відсутність підвищення концентрації GH ≥460 пмоль/л [10 мкг/л] у 2 пробах стимуляції (інсуліном, глюкагоном, клонідином, GHRH або аналогом греліну) підтверджує соматотропний гіпопітуїтаризм (див. також табл. IV.I.2-2).
Інгібіторні проби: напр., пробу інгібіції GH після навантаження глюкозою використовують для діагностики акромегалії, троби інгібіції АКТГ та кортизолу дексаметазоном - для діагностики синдрому Кушинга.
Проби з аналогами та агоністами гіпоталамічних статинів: тест з октреотидом (200 мкг п/ш) або бромокриптином (2,5 мг п.о.) корисні для прогнозування ефективності фармакологічного лікування пухлин гіпофіза.
Проба з метоклопрамідом, блокатором D2-допамінових рецепторів, блокує дію ендогенного допаміну і може бути корисною для диференціальної діагностики типів гіперпролактинемії.
Потрібно пам'ятати, що існують певні обмеження щодо інтерпретації гормональних та функціональних проб (напр., низький рівень TSH іноді спостерігається без патогенних причин у людей похилого віку, порушена секреція GH притаманна людям з ожирінням). У свою чергу, підвищення ACTH або PRL може бути результатом неспецифічного стресу при заборі крові.