Actividad de las esterasas leucocitarias

Las esterasas leucocitarias constituyen un grupo de 9 isoenzimas que hidrolizan los ésteres acilcloro de α-naftil o de naftol AS-D. Las isoenzimas forman 2 grupos, el de la esterasa específica y no específica.

La esterasa específica (AS-D cloroacetato esterasa) no es sensible a la inhibición con fluoruro sódico. Si se utiliza AS-D cloroacetato como sustrato, los promielocitos y neutrófilos muestran la actividad de esta esterasa. En otras células —eosinófilos, basófilos, monocitos, linfocitos, plasmocitos, eritroblastos y megacariocitos— no la hay o es muy débil. Se observa una reacción positiva en las mismas células que se tiñen con sudán negro B y en la MPO.

La esterasa no específica (de α-naftil) es sensible a la inhibición por fluoruro de sodio. Todas las células de la hematopoyesis demuestran su actividad, aunque es mayor en los monocitos. En la línea granulocitopoyética, su actividad aumenta junto con la maduración celular hacia el estadio de promielocito. En los mieloblastos se encuentran gránulos aislados que indican poca actividad. Los linfocitos se tiñen débilmente. La actividad de esta enzima se produce en los blastos de la leucemia aguda monoblástica y linfoblástica de células T, así como en los eritroblastos de la anemia megaloblástica.

Métodos de análisis

Tras fijar los frotis de médula o de sangre, se incuban en la mezcla de incubación y se añade naftol AS-D cloroacetato. Después de secar los preparados, se tiñen con hematoxilina y se examinan bajo el microscopio. Los núcleos celulares son de color azul y la actividad de la esterasa se expresa con el color rojo.

En el examen de la actividad de la esterasa no específica, se añade a la mezcla de incubación una solución de α-naftil acetato. Los núcleos celulares son azules y la actividad de la esterasa se expresa con el color marrón oscuro o azul (→fig. VI.C.3-3).

La inhibición de la actividad de esta esterasa se produce al añadir fluoruro de sodio (→fig. VI.C.3-4).

Utilidad clínica

1) clasificación de leucemias agudas (→tabla VI.E.1-3)

2) diagnóstico diferencial de leucemia mielomonocítica aguda (reacción fuertemente positiva) y otras leucemias mieloides agudas (ausencia de reacción o reacción muy débil).