Citogenética molecular

El estudio citogenético molecular que se utiliza más frecuentemente —la hibridación fluorescente in situ (FISH)— complementa el bandeo G con tripsina y Giemsa en el momento de diagnosticar la enfermedad, y puede servir durante su curso para observar los cambios genéticos detectados previamente con el bandeo o la FISH. En la versión básica aplicada de forma rutinaria, el método FISH es una prueba dirigida, o sea, permite evaluar solo la presencia de una aberración o reorganización determinadas, que se intentan detectar, o 2-3 cambios de este tipo. En oncohematología, el estudio sirve sobre todo para identificar reordenamientos genéticos, complejos cambios en el cariotipo o aberraciones ocultas, imposibles de detectar con el bandeo G, así como en casos en los que falla el cultivo celular (necesario para realizar el bandeo G). La FISH se aplica a todo el ciclo de vida celular: tanto a las células en la etapa de metafase (FISH para los cromosomas de la metafase) como a las de interfase (FISH para las células de la interfase), por lo que puede usarse para el análisis de frotis de médula ósea, muestras citológicas (p. ej. biopsia con aguja fina) y secciones de tejidos (p. ej. de ganglio linfático). Se analizan rutinariamente 200-500 células, por lo tanto, es posible determinar con precisión el porcentaje de células con un cambio genético dado, lo que es importante para evaluar la eficacia del tratamiento o el quimerismo (coexistencia de las células del donante y del receptor) después del trasplante de células hematopoyéticas alogénicas (alo-HCT →cap. VI.L). El resultado del análisis de un gen de fusión específico con la técnica FISH es objetivo e independiente del tipo de fusión (p. ej. en el caso del gen de fusión BCR-ABL1, el resultado de la prueba FISH con sondas para los genes BCR y ABL1 siempre es positivo, independientemente de su tamaño y puntos de rupturas y conexiones de los genes).

También hay métodos no dirigidos que permiten la tinción diferencial de todos los pares de cromosomas, p. ej. multi-FISH y cariotipado espectral (SKY — spectral karyotyping), no obstante, debido al alto coste, no se aplican de manera rutinaria.